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石蜡切片

       石蜡切片是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究。日常教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。

       

       一、技术流程:














二、样品准备方式:

1. 动物组织(4%多聚甲醛固定)

2. 植物组织(50-70%FAA固定,并且抽真空)


三.染色方式介绍:

1. HE染色切片(动物组织):

苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。














2. 番红-固绿染色(植物组织):

植物番红固绿染色,石蜡切片技术里用观察植物组织的形态结构。韧皮部形成层芽尖根尖分生去等新生组织结构呈绿色,木质化木酸化的结构呈红色(软化后的木质化结构成分流失,结果呈绿色)。












3. 甲苯胺蓝染色(植物组织):

甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种多色碱性染料,可使植物组织和细胞的不同成分染成不同的颜色。木质化部分呈蓝绿色,韧皮部呈蓝紫色,其他部分呈浅的蓝绿色。













4. 间苯三酚染色(植物组织):

间苯三酚反应是植物纤维化学中确定木质化细胞壁的最常用和最简单的方法。这一反应的原理是当间苯三酚在酸性环境下与细胞壁中的木质素相遇时,发生樱桃红色或紫红色反应。











5. 气孔刮片(新鲜叶片):

将新鲜叶片用小刀刮片至气孔层,并且进行观察。常用于观察不同状态下气孔形态与分布。















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